DNA- und RNA-Extraktion und Analyse
Analysen von DNA bzw. RNA setzen die Isolation sowie Charakterisierung der Nukleinsäuren voraus, welche dann für weitere Applikationen, wie Genotypisierung, Genexpressionsanalyse, epigenetische Analyse, Mikrobiomstudien und viele weitere wissenschaftliche Fragestellungen, verwendet werden. RNA- und DNA-Analysen umfassen eine Reihe molekularbiologischer Methoden - neben Extraktion und Aufreinigung der Nukleinsäuren sind hierbei die Amplifikation über PCR bzw. qPCR, molekulare Klonierung oder Sequenzierung zu nennen.
Nucleic Acid Analysis Product Categories
Nukleinsäureanalysen - Produktkategorien
Klonierung und DNA-Marker
Restriktionsenzyme, DNA modifizierende Enzyme, Vektoren, Molekulargewicht-Marker
Epigenetik
Kits und Reagenzien für Ihre Epigenetik-Forschung, wie DNA-Methylierungsanalyse, PCR und qPCR, Luciferase-Reporterassays, HDAC Assays und HaloTag-Proteinaufreinigungssysteme
DNA- und RNA-Extraktion
Hier finden Sie eine Reihe von Nukleinsäure-Extraktionskits. Von manuellen Lösungen für Einzelproben bis zu plattenbasierten Verfahren
PCR und qPCR
Alles rund um die PCR, qPCR und RT-qPCR
RNA-Analyse und Quantifizierung von Nukleinsäuren
Hier finden Sie Produkte zur Unterstützung der Aufreinigung, für den Schutz vor RNasen, Quantifizierung von RNA über fluoreszierende Farbstoffe und Fluorometer sowie „All-Inclusive“-Kits für die RT-PCR
Sequenzierung
Produkte und Lösungen für die NGS Auf- und Nachbereitung
Vektoren
Informationen zu allen Promega Vektoren, mit detaillierten Produktinformationen und Links zur GenBank®, Bestellinformationen, Karten und Protokollen
Einführung in die DNA- und RNA-Analyse
Die Aufreinigung, Quantifizierung und Amplifikation von DNA und RNA sind weit verbreitete molekularbiologische Methoden, die bei zahlreichen Applikationen angewendet werden.
Die Extraktion hochwertiger Nukleinsäuren aus kultivierten Zellen, Bakterien, tierischem oder pflanzlichem Gewebe, Körperflüssigkeiten oder anderen Probentypen ist ein entscheidender erster Schritt für eine erfolgreiche molekularbiologische Analyse. Eine gute Qualität der extrahierten DNA/RNA ist daher entscheidend für den Erfolg der nachfolgenden Anwendungen, wie z.B. PCR oder Sequenzierung.
Die Wahl des geeigneten Aufreinigungsproduktes ist ausschlaggebend für den weiteren Erfolg eines Experimentes. So gibt es passende Aufreinigungskits für unterschiedlichste Probentypen und Applikationen. Vor allem für anspruchsvolle Probentypen, wie z.B. formalinfixierte, paraffineingebettete (FFPE) Gewebeproben, Plasma oder Serum mit zirkulierender zellfreier DNA (ccfDNA), forensische Proben oder weitere Proben-Quellen, bei denen das Ausgangsmaterial begrenzt ist, ist die Verwendung eines spezifischen Aufreinigungsproduktes erforderlich.
Nach der Aufreinigung werden die Nukleinsäuren quantifiziert. Hierbei gibt es unterschiedliche Methoden zur RNA- oder DNA-Quantifizierung, wie z.B. die Messung von fluoreszierenden DNA- oder RNA-Bindungsfarbstoffen, die UV-Spektrophotometrie mittels Absorption bei 260 nm oder die qPCR. Die Verhältnisse (Ratios) der Absorptionen 260/230 nm oder 260/280 nm, als ein Maß für den Reinheitsgrad der isolierten Nukleinsäuren, geben einen Entscheidungshilfe, ob das isolierte DNA- bzw. RNA-Material für die nachfolgende Applikation eingesetzt werden kann.
Real-time quantitative PCR (qPCR) sowie RT-qPCR, ist ein Standardverfahren zur Nukleinsäureamplifikation und dient als Quantifizierungsmethode für die Genexpression sowie als Nachweis spezifischer DNA-Sequenzen, wie beispielsweise Mutationen. Standard Endpunkt-PCR und RT-PCR werden zum Nachweis und zur Amplifikation spezifischer DNA-Sequenzen genutzt.
Klonierungsmethoden, einschließlich Restriktionsverdau, Subklonierung, PCR-Klonierung und bakterielle Zelltransformation, sind klassische Methoden zur genetischen Manipulation von Nukleinsäuren und sind somit wichtige Methoden zur Genomanalyse.
Die unten aufgeführten Ressourcen bieten ausführliche Informationen über Methoden zur Analyse von Nukleinsäuren und Links zu Produkten für jede Anwendung.